180 kDa Prestained Protein Marker
全程示踪,准确指示的预染marker
SDS-PAGE电泳
· 条带清晰锐利:三色预染;
· 高稳定性:4℃稳定存放3个月,反复冻融50次
180 kDa Prestained Protein Marker由10种预染蛋白质组成,分子量范围为10 kDa - 180 kDa。其中70 kDa为红色条带,15 kDa、25 kDa、35 kDa、40 kDa、55 kDa、100 kDa、130 kDa、180 kDa为蓝色条带,10 kDa为绿色条带。
由低到高的分子量范围可动态观察蛋白质电泳状态并清晰地判断目标蛋白的分子量,同时经SDS-PAGE电泳后转移到PVDF膜(或NC膜)上可见清晰的彩色条带,进而监测Western Blot实验中的转膜效率。本品推荐上样量为5 µl。
-30°C ~ -15°C保存,冰袋运输。
Q1:条带模糊
A1:(1)电压过高或电泳时间过长,产热过多导致电泳缓冲液温度升高;
(2)电泳缓冲液陈旧,建议使用新鲜配制的电泳缓冲液,为了获得理想的结果建议在使用前将缓冲液预冷;
(3)分离胶的浓度偏低,建议使用合适的胶浓度(12%);
(4)SDS-PAGE凝胶放置时间过长,建议使用新配制的凝胶进行电泳。
Q2:带型不整齐
A2:(1)建议点样时将蛋白Marker 放在泳道中间。如在凝胶两侧泳道,由于边缘效应,离子强度不匀等,均会导致带型变宽或弯曲;
(2)凝胶配制不匀,凝胶内存有气泡,或点样孔中有细碎的残胶;
(3)电压不稳定。
Q3:转完膜后,膜上没有任何条带,连marker条带都没有
A3:(1)确定Marker是预染Marker还是非预染Marker,非预染Marker条带需染色后才会有显色;
(2)转膜液:有无过期失效、是否加无水甲醇、是否在低温条件下进行转膜;
(3)考虑转膜装置的问题:黑面朝下,依次是海绵垫,滤纸,凝胶,PVDF膜,滤纸,海绵垫。确定是否放反导致电极反了;
(4)转膜条件设置是否合理:是否出现转膜时长过长的情况,导致条带转丢,可观察滤纸上是否有条带残留。
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