MGI平台转座酶法建库;全基因组测序;宏基因组测序
· 建库耗时短:单个样品建库时间约1.3 h
· 兼容性广:兼容不同物种基因组建库
· 下机数据质量优:GC偏好性方面,优于传统转座酶建库
TruePrep Flexible DNA Library Prep Kit for MGI是针对MGI高通量测序平台定向开发的专用试剂盒。该试剂盒采用新型的转座酶法进行DNA片段化,将繁琐的DNA片段化、末端修复和接头连接反应等步骤变为一步简单的酶促反应,显著缩短了文库构建时间。与常规的转座酶文库构建试剂盒相比,该试剂盒通过将转座酶化学偶联到磁珠上,从而显著提升了DNA模板投入量的兼容性,可以将100 pg - 500 ng DNA模板制备成MGI高通量测序平台专用的测序文库。
1. 稳定的文库产出
以293细胞gDNA为起始模板进行文库构建,投入量分别为100 pg(15 cycles)、1 ng(12 cycles)、5 ng(9 cycles)、10 ng(9 cycles)、25 ng(8 cycles)、50 ng(6 cycles)、100 ng(6 cycles)、500 ng(6 cycles)。Vazyme #TDM504文库产量高于Vazyme #TD504。
2. 物种兼容性
以293细胞、拟南芥、水稻、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、嗜盐古菌、λDNA为模板进行建库,Vazyme #TDM504文库产量均与Vazyme #TD504一致。
3. 优异的测序数据质量
对不同物种的全基因组文库进行测序,Vazyme #TDM504下机数据在Mapping Rate、Dup Rate、Coverage等方面表现良好。
BOX1, TNB 2 ~ 8℃保存,其余组分室温保存,根据不同目的地调整运输方式。
BOX2, -30 ~ -15℃保存, ≤0℃运输。
1. 使用该试剂盒是否需要对DNA进行精确定量?
不需要。 TruePrep Flexible DNA Library Prep Kit for MGI将转座酶偶联到磁珠上,从而显著提升了DNA模板投入量的兼容性,可以将100 pg - 500 ng DNA模板制备成MGI高通量测序平台专用的测序文库。
2. 是否适用于PCR产物建库?
可以,但应保证其长度>100 bp。因转座酶无法作用于DNA末端,所以PCR产物末端50 bp测序覆盖度会有所降低, 推荐在制备PCR产物时将待测区域两端各延长50 - 100 bp。
3. 组分TNB能否冻存?
不能。强烈建议将TNB置于2 ~ 8℃保存。
4. 使用TWB漂洗磁珠时,能否始终保持在磁力架上不进行重悬?
不推荐。不重悬漂洗可能会导致最终的文库产量比预期低。
5. 扩增后的PCR产物带有磁珠,能否使用转移的上清进行纯化或分选?
可以。该操作对文库产量及峰型无显著影响。
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