VAHTS AmpSeq Multi-PCR Module V3
超多重扩增;靶向测序;基因功能研究
· 多重性高:可兼容高达7,000重的定制化Panel
· 产出高:不同起始投入量下(1-100 ng),产出均高于A同类产品
· 均一度高:优化的多重扩增试剂,提高了扩增均一度
VAHTS AmpSeq Multi-PCR Module V3是在超多重PCR技术基础上,研发设计的一款扩增试剂,适用于1-100 ng起始的gDNA、FFPE DNA、cfDNA等模板的多重扩增。优化的多重扩增试剂包含扩增所需的酶、dNTP及反应Buffer,减少了实验过程中的移液操作,使结果更加稳定。相比于上一代产品(Vazyme #NA205),本试剂盒对不同Panel的扩增均一度有了较大提高,对不同模板起始量和定制化Panel均有着良好的扩增表现,并且可兼容高达7,000重的定制化Panel,可帮助研究者和检测人员简便、快速、高质量地完成超多重PCR扩增,产物适用于下游靶向扩增子文库构建等实验。本扩增试剂经过了严格的质量控制和功能验证,较大程度上保证了试剂的稳定性和重复性。
多重扩增文库产出
图1. 不同投入量和Panel条件下的多重扩增文库产出
以293T细胞基因组DNA为模板,Input DNA分别为1 ng、10 ng和100 ng;根据Vazyme #NA210、A公司同类产品说明书进行多重扩增,结果表明不同起始投入量和Panel条件下,多重扩增模块Vazyme #NA215的文库产出均高于A公司同类产品的扩增模块产出。
-30 ~ -15℃保存,≤0℃运输
1、产量偏低
①重新定量投入模板量,确认模板起始量是否正确。若低于下限1 ng,需提高投入模板量。
②若模板质量较差,可依据说明书适当提高循环数或使用高质量模板。
③请确认每一步体系以及程序是否按照说明书进行,并注意每一步骤中各项操作细节。
2. 产量偏高
①模板投入量是否高于100 ng,若高于,可减少模板投入量。
②多重扩增循环数可依据说明书适当降低。
3. 产物均一度偏低
①模板受损严重或PCR环节扩增不充分。请使用高质量模板或将PCR环节中退火延伸时间延长。
②AT含量高的扩增子较少:加倍退火延伸时间或将退火温度由60℃降低至58℃。
③GC含量高的扩增子较少:在PCR环节的前两个循环中,将退火温度由60℃提升至62℃。
4. 为什么需要分区操作
PCR产物极易产生气溶胶污染,进而导致实验结果不准确、可信度不高等问题。建议将PCR反应体系配制区和PCR反应区进行物理隔离,使用专用的移液器等设备,并定时对各实验区域进行清洁(使用0.5%次氯酸钠或10%漂白剂进行擦拭清理),以保证实验结果的可信度。
相关产品
N616-01/02
N411-01/02/03
Equalbit 1 × dsDNA HS Assay Kit
EQ121-01/02
VAHTS Maxi Unique Dual Index Primers Set 1 - Set 4 for Illumina
N34401/N34402/N34403/N34404-01
VAHTS Multiplex Oligos Set 4/5 for Illumina
N321/N322-01
VAHTS Dual UMI UDI Adapters Set 1 – Set 4 for Illumina
N351/N352/N353/N354
VAHTS Maxi Unique Dual Barcode Primers Set 1 - Set 4 for MGI
NM34401/NM34402/NM34403/NM34404—01