FastPure FFPE DNA Isolation Kit
无需过夜消化,安全无毒的FFPE样本提取
gDNA提取;产物可用于PCR、qPCR;文库构建;二代测序
· 安全无毒:提取过程采用无毒性脱蜡液脱蜡,不涉及二甲苯等有机试剂,安全无毒
· 快速:无需过夜孵育消化就可完成数个样品的提取工作
· 高效:独特的裂解液和特异的吸附柱提高 DNA 纯度
· 高产量:提取流程确保回收效率高
本产品适用于从福尔马林固定、石蜡包埋组织中分离纯化基因组DNA,克服了福尔马林交联造成的抑制效应。试剂盒采用比二甲苯更为安全的脱蜡液,并通过特异性结合DNA的离心吸附柱和独特的缓冲液系统,可得到高品质的DNA。整个提取过程只需20 min( 除消化时间 ),提取基因组完整性好,纯度高,质量稳定可靠,可用于PCR、qPCR、文库构建等多种下游实验。
本产品除Proteinase K以外的其他组分可在15 ~ 25℃条件下保存12个月,若需更长时间保存,则 置于2 ~ 8℃。2 ~ 8℃保存条件下若溶液产生沉淀,使用前应将试剂盒内溶液室温放置一段时间, 上下颠倒直至沉淀完全溶解;必要时可在37℃水浴中预热10 min,以溶解沉淀。
Q1:DC105吸附柱堵塞
A1:(1)样品用量过多:
减少样品用量,石蜡切片不要超过8~10张;
(2)脱蜡不充分:
处理样本时,刮去多余的石蜡。增加脱蜡液用量或者进行二次脱蜡,以彻底去除石蜡;
(3)样品消化不充分:
增加Proteinase K 工作液用量或者延长Proteinase K 工作液消化时间;
(4)消化液中存在不溶解的物质:
10,000 g 离心3 min 去除未消化的物质。
Q2:DNA产量低
A2:(1) 样品DNA含量低:使用保存时间短的样本或者新鲜样本进行提取,适当增加组织样本的用量;
(2) 样品消化不充分:增加Proteinase K工作液用量或者延长Proteinase K工作液消化时间让样品充分消化;
(3) Buffer FW1/FW2未添加无水乙醇:请参考试剂瓶标签说明加入正确体积的无水乙醇;
(4) 添加洗脱液前过度干燥吸附柱:吸附柱开盖时间不宜超过5 min,否则容易造成DNA洗脱困难;
(5) 洗脱不充分:洗脱液需加至吸附柱的膜中央,增加洗脱体积或次数。
Q3:DNA纯度低
A3:(1) 杂蛋白残留:加入Buffer FL和无水乙醇至样品中时要保证样品液中无沉淀;用Buffer FW1洗涤纯化吸附柱时务必使用正确的离心转速;
(2)盐离子残留:使用Buffer FW2洗涤时可洗涤纯化吸附柱2次;
(3)乙醇残留:确认空管离心后室温开盖使乙醇挥发完全;
(4)RNA污染:样品提取过程中提取到RNA:在90℃去交联后,待样品恢复至室温时,加入2μl RNase A (100mg/ml)至样品中,室温孵育2min。
Q4:DC105是否可以直接提取福尔马林浸泡的样本
A4:可以,样本组织不易过大,可直接从说明书使用方案第四步开始进行实验。
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